iptg为什么要低温诱导

@逄到5371:请教:IPTG的诱导原理是什么 -
赖泉19672879748…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导

@逄到5371:做低温诱导需要加iptg吗 - 作业帮
赖泉19672879748…… [答案] 需要的 低温诱导可以降低IPTG的量,比如0.1mM IPTG,延长诱导时间,比如12~16小时. 不加IPTG的话只有极个别情况下会出现泄漏表达.一般都是不表达的.

@逄到5371:甲基丙烯酸甲酯本体聚合预聚体为什么先低温再高温 -
赖泉19672879748…… 本体聚合时放热量很大,又难以及时排除,会使反应体系温度迅速升高而发生爆聚.所以要先低温以控制反应速度不要太剧烈,最后高温使单体能反应完全.

@逄到5371:低温诱导染色体数目变化的实验中,为什么要在低温环境下诱导36个小时 -
赖泉19672879748…… 至少要诱导培养1个细胞周期,这样才能够将大多数细胞培养成染色体加倍.另外低温下洋葱的细胞周期不再是12个小时左右,而可能达到30个小时左右.

@逄到5371:为什么使用iptg诱导蛋白表达 -
赖泉19672879748…… E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷 酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状...

@逄到5371:低温诱导蛋白表达时用多少度合适 -
赖泉19672879748…… IPTG 浓度时0.1mM 诱导时间一般24个小时 如果是冷休克载体的话是15度诱导, 不同的宿主和载体可能略有差异 可以以上面数据为基点,做个一定范围的探索.

@逄到5371:低温诱导染色体加倍和秋水仙素诱导的作用机理是怎样的?? -
赖泉19672879748…… 低温处理和秋水仙素诱导的作用机理一致,都是抑制纺锤体的形成,影响染色体被拉向细胞两极,阻止细胞分裂,导致染色体数目加倍.

@逄到5371:葡萄糖和乳糖细菌iptg怎么诱导 -
赖泉19672879748…… IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量(1mmol/L)即可达到理想诱导效果.由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达.不受细胞代谢的影响,诱导效果持续稳定.乳糖有双效作用,既能做为诱导剂异乳糖的前体物质,又可以做碳源,在诱导过程中,很不稳定,IPTG因其优异的稳定性决定了它适合做实验研究用.但是IPTG价格高,且有毒性,限制了其工业化大生产.

@逄到5371:pET载体如何诱导表达 -
赖泉19672879748…… PET系列是IPTG诱导表达的,一般构建了PET表达载体导入表达宿主菌(BL21等),用LB培养基在37度液体培养到OD600值0.7左右的时候,加入终浓度为0.1-1.0mM的IPTG(浓度对诱导表达影响不是很大,对于PET系统,对IPTG浓度要求稍...

@逄到5371:为什么低温诱导染色体变异需诱导36小时 -
赖泉19672879748…… 低温诱导染色体变异主要是指低温诱导染色体数目加倍.解析:用低温处理植物组织细胞,抑制纺缍体的形成,从而使染色体不能移向细胞两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,最终,植物细胞染色体数目加倍.

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