iptg诱导机制
@漆霞4492：请教:IPTG的诱导原理是什么 -
年琛15586293974…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@漆霞4492：IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
年琛15586293974…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@漆霞4492：葡萄糖和乳糖细菌iptg怎么诱导 -
年琛15586293974…… IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量(1mmol/L)即可达到理想诱导效果.由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达.不受细胞代谢的影响,诱导效果持续稳定.乳糖有双效作用,既能做为诱导剂异乳糖的前体物质,又可以做碳源,在诱导过程中,很不稳定,IPTG因其优异的稳定性决定了它适合做实验研究用.但是IPTG价格高,且有毒性,限制了其工业化大生产.
@漆霞4492：为什么使用iptg诱导蛋白表达 -
年琛15586293974…… E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷 酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状...
@漆霞4492：IPTG诱导表达的作用原理是什么? -
年琛15586293974…… Binding of the repressor-IPTG complex to the operator can be studied by using greater concentrations of the protein in the methylation protection/enhancement assay. The large amount compensates for the low affinity of the repressor-IPTG complex...
@漆霞4492：pgex - 6p - 1怎样用iptg诱导 -
年琛15586293974…… 一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大孝性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻.
@漆霞4492：大肠杆菌乳糖操纵子调控机理 -
年琛15586293974…… 大肠杆菌乳糖操纵子包括4类基因:①结构基因,能通过转录、翻译使细胞产生一定的酶系统和结构蛋白,这是与生物性状的发育和表型直接相关的基因.乳糖操纵子包含3个结构基因:lacZ、lacY、lacA.LacZ合成β—半乳糖苷酶,lacY合成透过...
@漆霞4492：蓝白斑筛选 -
年琛15586293974…… α-互补 的原理 载体上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能.E. coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分...
@漆霞4492：IPTG的作用 - 作业帮
年琛15586293974…… [答案] 蓝白斑筛选时的诱导剂,诱导基因表达β-半乳糖苷酶,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落.
年琛15586293974…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@漆霞4492：IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
年琛15586293974…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@漆霞4492：葡萄糖和乳糖细菌iptg怎么诱导 -
年琛15586293974…… IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量(1mmol/L)即可达到理想诱导效果.由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达.不受细胞代谢的影响,诱导效果持续稳定.乳糖有双效作用,既能做为诱导剂异乳糖的前体物质,又可以做碳源,在诱导过程中,很不稳定,IPTG因其优异的稳定性决定了它适合做实验研究用.但是IPTG价格高,且有毒性,限制了其工业化大生产.
@漆霞4492：为什么使用iptg诱导蛋白表达 -
年琛15586293974…… E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷 酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状...
@漆霞4492：IPTG诱导表达的作用原理是什么? -
年琛15586293974…… Binding of the repressor-IPTG complex to the operator can be studied by using greater concentrations of the protein in the methylation protection/enhancement assay. The large amount compensates for the low affinity of the repressor-IPTG complex...
@漆霞4492：pgex - 6p - 1怎样用iptg诱导 -
年琛15586293974…… 一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大孝性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻.
@漆霞4492：大肠杆菌乳糖操纵子调控机理 -
年琛15586293974…… 大肠杆菌乳糖操纵子包括4类基因:①结构基因,能通过转录、翻译使细胞产生一定的酶系统和结构蛋白,这是与生物性状的发育和表型直接相关的基因.乳糖操纵子包含3个结构基因:lacZ、lacY、lacA.LacZ合成β—半乳糖苷酶,lacY合成透过...
@漆霞4492：蓝白斑筛选 -
年琛15586293974…… α-互补 的原理 载体上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能.E. coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分...
@漆霞4492：IPTG的作用 - 作业帮
年琛15586293974…… [答案] 蓝白斑筛选时的诱导剂,诱导基因表达β-半乳糖苷酶,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落.
