吸光度cck8测ic50
@向灵6132：设计测量酶抑制剂IC50的实验 -
郝汪19758438103…… 抑制剂和酶的结合速度要看情况而定,主要和你的抑制剂有关,许多情况下结合得很快,但是也有slow binding inhibitor(我最近做的一个就是,抑制剂和酶的平衡时间很长,中途加根本看不出变化,必须吧抑制剂和酶一起incubate 15分钟,然...
@向灵6132：origin怎么算ic50(半抑制浓度)? -
郝汪19758438103…… 定义 IC50中文名称叫做半抑制率,在间接竞争ELISA标准曲线中是一个非常重要的数据, 标准曲线是一个S型曲线. ICELISA中,不添加抑制物质的对照孔的OD值为B0, 添加了抑制物质的孔的OD值为B B/B0% 就叫做结合率, 在结合率为50%...
@向灵6132：做 cck8没有及时测 在室温有光的情况下静置了10min钟 有影响么 -
郝汪19758438103…… CCK8操作说明细胞活性检测 1. 在96 孔板中接种细胞悬液 (100 ml /孔 ) .将培养板放在培养箱预培养 (在37 ℃,5% CO2的条件下 ). 2. 向每孔加入10 ml 的CCK- 8溶液 (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 O.D值的读数) . 3. 将培养...
@向灵6132：ic50计算方法
郝汪19758438103…… 有很多方法,如线性拟合法,寇式改良法以及软件,还有Graphpad Prism求IC50
@向灵6132：IC50的IC50 -
郝汪19758438103…… IC50和EC50的计算一般需要测定5个以上的点,再通过曲线拟合得到函数计算而得,或者假设IC50(EC50)附近的点连成直线计算而得等,但这都存在较大的误差.因为拟合的函数曲线并不能保证都通过所测定的点,其次IC50(EC50)附近的点并...
@向灵6132：如何用IC50比较Vc和L - 茶氨酸的抗氧化能力?其他非实验方法也可以 -
郝汪19758438103…… 抗氧化活性实验方法(体外实验) 1、清除DPPH自由基能力的测定 称取一定量的DPPH,用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液.分别取2mL不同浓度(2,4,6,8mg/mL)的溶液,加入2mL DPPH溶液,混合均匀,室温放置30min后,5000r/min离心10min.取上清液于517nm处测吸光值.用Vc作为阳性对照.样品对DPPH自由基的清除率用以下公式计算:
@向灵6132：在介质吸收光谱实验中如何测量高吸光度物质的吸收光谱?还有减光片的作用是什么?如何使用? -
郝汪19758438103…… 1, 用光纤连接光源—样品池,以及样品池—光谱仪 2, 封锁光谱仪光路测量暗光谱(一般为0),并进行记录 3, 打开光源,经过一段时间后使光源稳定 4, 测量参考光谱I0并进行记录 5, 分别将印度墨水溶液和伊文思蓝溶液倒入...
@向灵6132：我想测吸光度用酶标仪,用多孔细胞培养板行吗?请问酶标板 多孔细胞培养板有什么区别? -
郝汪19758438103…… 酶标仪是可以测定吸光度的,但只能酶标板和96孔细胞培养板,酶标板主要是做ELISA,细胞培养板主要是培养细胞后再通过加入MTT、CCK8等来使活细胞线粒体生成甲参而呈色.多孔细胞板除了96孔之外还有6、12、24孔等.
@向灵6132：为什么要在最大吸收波长处测得混合物的吸光度 -
郝汪19758438103…… 1、最大吸收波长处检测的原因:按照检测需求,一般有特征吸收,就可以拿特征吸收来定量.至于最大吸收波长处测定可以减小误差.或者说可以提升误差容许率.使得检测结果的准确性和可靠性更高. 2、吸光度检测的目的:吸光度检测的意义在于能够通过特定波长来检测物质在混合体系中的浓度.最大吸收波长:对应特定物质的最强吸收时的波长,这个波长是往往是一个区间值,强吸收峰处波长变化对结果影响较小.而在弱峰处微弱波动可能导致严重的误差,致使结果错误. 3、“一定要在最大吸收波长处检测吗?”这个不一定,如果混合物在最大吸收处有干扰,而在其他的一个次峰处没有干扰,依然可以通过标定该吸收波长位置对需测定的物质进行吸光检测得到一个准确的结果.
郝汪19758438103…… 抑制剂和酶的结合速度要看情况而定,主要和你的抑制剂有关,许多情况下结合得很快,但是也有slow binding inhibitor(我最近做的一个就是,抑制剂和酶的平衡时间很长,中途加根本看不出变化,必须吧抑制剂和酶一起incubate 15分钟,然...
@向灵6132：origin怎么算ic50(半抑制浓度)? -
郝汪19758438103…… 定义 IC50中文名称叫做半抑制率,在间接竞争ELISA标准曲线中是一个非常重要的数据, 标准曲线是一个S型曲线. ICELISA中,不添加抑制物质的对照孔的OD值为B0, 添加了抑制物质的孔的OD值为B B/B0% 就叫做结合率, 在结合率为50%...
@向灵6132：做 cck8没有及时测 在室温有光的情况下静置了10min钟 有影响么 -
郝汪19758438103…… CCK8操作说明细胞活性检测 1. 在96 孔板中接种细胞悬液 (100 ml /孔 ) .将培养板放在培养箱预培养 (在37 ℃,5% CO2的条件下 ). 2. 向每孔加入10 ml 的CCK- 8溶液 (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 O.D值的读数) . 3. 将培养...
@向灵6132：ic50计算方法
郝汪19758438103…… 有很多方法,如线性拟合法,寇式改良法以及软件,还有Graphpad Prism求IC50
@向灵6132：IC50的IC50 -
郝汪19758438103…… IC50和EC50的计算一般需要测定5个以上的点,再通过曲线拟合得到函数计算而得,或者假设IC50(EC50)附近的点连成直线计算而得等,但这都存在较大的误差.因为拟合的函数曲线并不能保证都通过所测定的点,其次IC50(EC50)附近的点并...
@向灵6132：如何用IC50比较Vc和L - 茶氨酸的抗氧化能力?其他非实验方法也可以 -
郝汪19758438103…… 抗氧化活性实验方法(体外实验) 1、清除DPPH自由基能力的测定 称取一定量的DPPH,用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液.分别取2mL不同浓度(2,4,6,8mg/mL)的溶液,加入2mL DPPH溶液,混合均匀,室温放置30min后,5000r/min离心10min.取上清液于517nm处测吸光值.用Vc作为阳性对照.样品对DPPH自由基的清除率用以下公式计算:
@向灵6132：在介质吸收光谱实验中如何测量高吸光度物质的吸收光谱?还有减光片的作用是什么?如何使用? -
郝汪19758438103…… 1, 用光纤连接光源—样品池,以及样品池—光谱仪 2, 封锁光谱仪光路测量暗光谱(一般为0),并进行记录 3, 打开光源,经过一段时间后使光源稳定 4, 测量参考光谱I0并进行记录 5, 分别将印度墨水溶液和伊文思蓝溶液倒入...
@向灵6132：我想测吸光度用酶标仪,用多孔细胞培养板行吗?请问酶标板 多孔细胞培养板有什么区别? -
郝汪19758438103…… 酶标仪是可以测定吸光度的,但只能酶标板和96孔细胞培养板,酶标板主要是做ELISA,细胞培养板主要是培养细胞后再通过加入MTT、CCK8等来使活细胞线粒体生成甲参而呈色.多孔细胞板除了96孔之外还有6、12、24孔等.
@向灵6132：为什么要在最大吸收波长处测得混合物的吸光度 -
郝汪19758438103…… 1、最大吸收波长处检测的原因:按照检测需求,一般有特征吸收,就可以拿特征吸收来定量.至于最大吸收波长处测定可以减小误差.或者说可以提升误差容许率.使得检测结果的准确性和可靠性更高. 2、吸光度检测的目的:吸光度检测的意义在于能够通过特定波长来检测物质在混合体系中的浓度.最大吸收波长:对应特定物质的最强吸收时的波长,这个波长是往往是一个区间值,强吸收峰处波长变化对结果影响较小.而在弱峰处微弱波动可能导致严重的误差,致使结果错误. 3、“一定要在最大吸收波长处检测吗?”这个不一定,如果混合物在最大吸收处有干扰,而在其他的一个次峰处没有干扰,依然可以通过标定该吸收波长位置对需测定的物质进行吸光检测得到一个准确的结果.
