5乘的loading+buffer
@惠晴3101：WESTERN BLOT煮蛋白用得是几乘的loading buffer ,样品100ul, 5 乘的加多少? -
葛吕13654716599…… 一般用1乘的终浓度,那么: 1如果你最终样品溶液希望是100ul,那就是:样品+20(ul)5乘原液+80(ul)ddH2O 2如果你的样品已经有100ul,那就看你拿多大的管子来煮了.如果用2ml管子煮,最好配1ml终液,那就是:样品液(100ul)+200(ul)5乘原液+700(ul)ddH2O 总之,记住5乘原液的话是1:4的关系,即1份5乘原液+4份其他.
@惠晴3101：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?请大神解答,3Q~ -
葛吕13654716599…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.
@惠晴3101：为什么在DNA电泳上样是要加六倍的上样缓冲液 -
葛吕13654716599…… 加的是6*的loading buffer,不是说要加6倍的缓冲液,而是说加5微升的DNA样品,需要加1微升的6*上样缓冲液,这样6*的缓冲液被稀释成1*的了,1*才是缓冲液的工作浓度. 不懂的话再追问啊
@惠晴3101：哪位有6*Loading Buffer配方 -
葛吕13654716599…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@惠晴3101：loading buffer 怎么调蛋白浓 -
葛吕13654716599…… 要用loading buffer来调整蛋白浓度,可以通过配制出不同浓度的loading buffer来实现 最终加入到蛋白样品的loading buffer应该是1个单位的 可以通过配制出2~10个单位不等的loading buffer来调整蛋白浓度 比如2个单位的loading buffer加入蛋白样品,可以将蛋白浓度稀释一倍 而4个单位的loading buffer加入蛋白样品,就只能稀释25% 所以可以通过配制出不同浓度的loading buffer来调整蛋白浓度
@惠晴3101：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少 -
葛吕13654716599…… 主要决定loading buffer的浓度,DNA样品上样buffer(商品化或者是实验室自己配置的)主要是6X的,如果你上样DNA的体积是10ul的话,你只需要加入2ul的6X loading buffer后,混匀上样即可.
@惠晴3101：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
葛吕13654716599…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@惠晴3101：求助蛋白电泳1*loading buffer -
葛吕13654716599…… 蛋白电泳1*loading buffer可以配制出来,但是却很难在实际使用的时候用上 比如说蛋白电泳5*loading buffer,在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品.这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1*loading buffer 如果说1*loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品,这样的loading buffer配制出来也没办法用.所以说蛋白电泳1*loading buffer是指应用时的情况,而不是配制的浓度
@惠晴3101：PCR产物进行凝胶电泳电压、时间各是多少好 还有溴酚蓝的量 已知PCR产物制取2ul
葛吕13654716599…… 先说溴酚蓝,先搞搞清楚,你加的溴酚蓝,还是含有溴酚蓝的loading buffer?? loading buffer在管子上有写明用量,比如5X的loading buffer就是5μl上样量中占1μl,也就是1μl loading buffer+4μl待测PCR产物混合上样. 电压80-150V都可以用,效果也都不错,其他电压不推荐,电压太高可能熔胶,电压太低跑太慢. 时间?看溴酚蓝位置,不要跑出胶就行.
@惠晴3101：rna凝胶检测上样 加多少loading buffer -
葛吕13654716599…… 和琼脂糖凝胶电泳的上样缓冲液一样 6*loading buffer 或10*loading buffer
葛吕13654716599…… 一般用1乘的终浓度,那么: 1如果你最终样品溶液希望是100ul,那就是:样品+20(ul)5乘原液+80(ul)ddH2O 2如果你的样品已经有100ul,那就看你拿多大的管子来煮了.如果用2ml管子煮,最好配1ml终液,那就是:样品液(100ul)+200(ul)5乘原液+700(ul)ddH2O 总之,记住5乘原液的话是1:4的关系,即1份5乘原液+4份其他.
@惠晴3101：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?请大神解答,3Q~ -
葛吕13654716599…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.
@惠晴3101：为什么在DNA电泳上样是要加六倍的上样缓冲液 -
葛吕13654716599…… 加的是6*的loading buffer,不是说要加6倍的缓冲液,而是说加5微升的DNA样品,需要加1微升的6*上样缓冲液,这样6*的缓冲液被稀释成1*的了,1*才是缓冲液的工作浓度. 不懂的话再追问啊
@惠晴3101：哪位有6*Loading Buffer配方 -
葛吕13654716599…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@惠晴3101：loading buffer 怎么调蛋白浓 -
葛吕13654716599…… 要用loading buffer来调整蛋白浓度,可以通过配制出不同浓度的loading buffer来实现 最终加入到蛋白样品的loading buffer应该是1个单位的 可以通过配制出2~10个单位不等的loading buffer来调整蛋白浓度 比如2个单位的loading buffer加入蛋白样品,可以将蛋白浓度稀释一倍 而4个单位的loading buffer加入蛋白样品,就只能稀释25% 所以可以通过配制出不同浓度的loading buffer来调整蛋白浓度
@惠晴3101：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少 -
葛吕13654716599…… 主要决定loading buffer的浓度,DNA样品上样buffer(商品化或者是实验室自己配置的)主要是6X的,如果你上样DNA的体积是10ul的话,你只需要加入2ul的6X loading buffer后,混匀上样即可.
@惠晴3101：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
葛吕13654716599…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@惠晴3101：求助蛋白电泳1*loading buffer -
葛吕13654716599…… 蛋白电泳1*loading buffer可以配制出来,但是却很难在实际使用的时候用上 比如说蛋白电泳5*loading buffer,在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品.这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1*loading buffer 如果说1*loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品,这样的loading buffer配制出来也没办法用.所以说蛋白电泳1*loading buffer是指应用时的情况,而不是配制的浓度
@惠晴3101：PCR产物进行凝胶电泳电压、时间各是多少好 还有溴酚蓝的量 已知PCR产物制取2ul
葛吕13654716599…… 先说溴酚蓝,先搞搞清楚,你加的溴酚蓝,还是含有溴酚蓝的loading buffer?? loading buffer在管子上有写明用量,比如5X的loading buffer就是5μl上样量中占1μl,也就是1μl loading buffer+4μl待测PCR产物混合上样. 电压80-150V都可以用,效果也都不错,其他电压不推荐,电压太高可能熔胶,电压太低跑太慢. 时间?看溴酚蓝位置,不要跑出胶就行.
@惠晴3101：rna凝胶检测上样 加多少loading buffer -
葛吕13654716599…… 和琼脂糖凝胶电泳的上样缓冲液一样 6*loading buffer 或10*loading buffer
