gapdh二抗是鼠还是兔
@郝亚1966:生物试剂名的一个问题生物试剂名称一般有什么规则,比如:GAPDH,Rabbit Monoclonal Antibody 这个表示兔单抗,抗GAPDH的,对吗?有没有系统一点的... - 作业帮
郗露15766622447…… [答案] 对的,看产品说明
@郝亚1966:上完gapdh的抗体还要上二抗吗 -
郗露15766622447…… 这涉及到抗体识别抗原的原理和抗体的结构. 比如你要检测的蛋白为A,它有a, b, c, d 四个表位(epitope),可以被抗体特异性认识.制作针对A的抗体是将蛋白A的一段,比如包含b+c段,打入兔子(最常见)或其他动物(山羊goat,大鼠rat...
@郝亚1966:二抗是抗鼠的,却与一抗兔反应出结果 -
郗露15766622447…… 鼠的某种蛋白质(比如某种细胞因子或者膜蛋白)对于羊来说是异物,所以当将鼠的这种蛋白质注入羊体内的时候羊就会产生针对该抗原的抗体,当然抗体可能有好几种,其中IgG是最主要的抗体,该抗体就称为羊抗鼠IgG抗体. 羊抗兔IgG抗体同理. 不过现在的技术发达了,为了大批量生产抗体,大多数都是通过单克隆技术完成的. PS:你的IGg的写法有误,应为IgG或者IgM...
@郝亚1966:western blot的抗体怎么选择? -
郗露15766622447…… 做原核表达蛋白western一个要注意的问题就是上样的蛋白不能太大,最好在100ng以下.以防止因为蛋白量太大引起非特异性信号.
@郝亚1966:求助选择什么作为内参 -
郗露15766622447…… 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃
@郝亚1966:制备二抗的宿主,为什么应选择另外一种不同的动物 -
郗露15766622447…… 二抗选择 (1)种属来源.主要根据一抗种属来源而决定二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可). (2)标记物的选择.有HRP、Biotin、荧光素等标记物.免疫组化,WB二抗主要选择HRP,Biotin标记的二抗,而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、Cy3、PE等.
@郝亚1966:不同动物的IgG -
郗露15766622447…… 说科的话,由于基因上分开进化了不少时间,所以用来重排产生抗体的基因序列本来就有了很大的变化,而且重排机制也各不相同,所以产生强烈交叉反应的可能性不大,如果不放心的话可以用固相交叉抗原清除交叉反应的杂抗体,但是一般不...
@郝亚1966:请教第一抗体、第二抗体 -
郗露15766622447…… 应该是我们平时经常提到的一抗、二抗吧.一抗是与目的蛋白结合的特异性抗体,二抗可以与一抗结合,一般有兔抗、鼠抗等,含有HRP标记,可以与底物反应显影.…………………………………………详细资料请参考:血管通透性检测: http://product.bio1000.com/102932/
@郝亚1966:荧光双标技术中制备二抗时是否需要两个不同的动物?用同一个动物可以吗?两个不同的一抗去制备二抗时,是否需要免疫不同的动物制备二抗?如果两个一... - 作业帮
郗露15766622447…… [答案] 理论上是可以的 但是效果可能不好
@郝亚1966:如何选择二抗 -
郗露15766622447…… 如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗 二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品.检测任何目的靶...
郗露15766622447…… [答案] 对的,看产品说明
@郝亚1966:上完gapdh的抗体还要上二抗吗 -
郗露15766622447…… 这涉及到抗体识别抗原的原理和抗体的结构. 比如你要检测的蛋白为A,它有a, b, c, d 四个表位(epitope),可以被抗体特异性认识.制作针对A的抗体是将蛋白A的一段,比如包含b+c段,打入兔子(最常见)或其他动物(山羊goat,大鼠rat...
@郝亚1966:二抗是抗鼠的,却与一抗兔反应出结果 -
郗露15766622447…… 鼠的某种蛋白质(比如某种细胞因子或者膜蛋白)对于羊来说是异物,所以当将鼠的这种蛋白质注入羊体内的时候羊就会产生针对该抗原的抗体,当然抗体可能有好几种,其中IgG是最主要的抗体,该抗体就称为羊抗鼠IgG抗体. 羊抗兔IgG抗体同理. 不过现在的技术发达了,为了大批量生产抗体,大多数都是通过单克隆技术完成的. PS:你的IGg的写法有误,应为IgG或者IgM...
@郝亚1966:western blot的抗体怎么选择? -
郗露15766622447…… 做原核表达蛋白western一个要注意的问题就是上样的蛋白不能太大,最好在100ng以下.以防止因为蛋白量太大引起非特异性信号.
@郝亚1966:求助选择什么作为内参 -
郗露15766622447…… 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃
@郝亚1966:制备二抗的宿主,为什么应选择另外一种不同的动物 -
郗露15766622447…… 二抗选择 (1)种属来源.主要根据一抗种属来源而决定二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可). (2)标记物的选择.有HRP、Biotin、荧光素等标记物.免疫组化,WB二抗主要选择HRP,Biotin标记的二抗,而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、Cy3、PE等.
@郝亚1966:不同动物的IgG -
郗露15766622447…… 说科的话,由于基因上分开进化了不少时间,所以用来重排产生抗体的基因序列本来就有了很大的变化,而且重排机制也各不相同,所以产生强烈交叉反应的可能性不大,如果不放心的话可以用固相交叉抗原清除交叉反应的杂抗体,但是一般不...
@郝亚1966:请教第一抗体、第二抗体 -
郗露15766622447…… 应该是我们平时经常提到的一抗、二抗吧.一抗是与目的蛋白结合的特异性抗体,二抗可以与一抗结合,一般有兔抗、鼠抗等,含有HRP标记,可以与底物反应显影.…………………………………………详细资料请参考:血管通透性检测: http://product.bio1000.com/102932/
@郝亚1966:荧光双标技术中制备二抗时是否需要两个不同的动物?用同一个动物可以吗?两个不同的一抗去制备二抗时,是否需要免疫不同的动物制备二抗?如果两个一... - 作业帮
郗露15766622447…… [答案] 理论上是可以的 但是效果可能不好
@郝亚1966:如何选择二抗 -
郗露15766622447…… 如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗 二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品.检测任何目的靶...