蛋白loading用什么稀释

@勾凌6490:western blot中蛋白样品浓度怎样稀释 -
子卓19124476687…… 蛋白提取时一般都是用裂解液进行提取,如果要稀释的话可以直接用PBS

@勾凌6490:蛋白电泳蛋白浓度过高用什么稀释 -
子卓19124476687…… 你的蛋白用什么溶解的就用什么稀释 如果已经加了Loading buffer,要保持Loading buffer的浓度,不要也一起稀释了

@勾凌6490:western blot中蛋白样品浓度怎样稀释?用PBS稀释吗?如果说每孔加入50ug,上样量25ul,那么是不是把蛋白稀释成2.4ug/ul,然后在加入6*loadingbuffer变... - 作业帮
子卓19124476687…… [答案] 计算出样品及buffer的体积,加水补足到25ul

@勾凌6490:loading buffer 怎么调蛋白浓 -
子卓19124476687…… 要用loading buffer来调整蛋白浓度,可以通过配制出不同浓度的loading buffer来实现 最终加入到蛋白样品的loading buffer应该是1个单位的 可以通过配制出2~10个单位不等的loading buffer来调整蛋白浓度 比如2个单位的loading buffer加入蛋白样品,可以将蛋白浓度稀释一倍 而4个单位的loading buffer加入蛋白样品,就只能稀释25% 所以可以通过配制出不同浓度的loading buffer来调整蛋白浓度

@勾凌6490:求助蛋白电泳1*loading buffer -
子卓19124476687…… 蛋白电泳1*loading buffer可以配制出来,但是却很难在实际使用的时候用上 比如说蛋白电泳5*loading buffer,在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品.这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1*loading buffer 如果说1*loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品,这样的loading buffer配制出来也没办法用.所以说蛋白电泳1*loading buffer是指应用时的情况,而不是配制的浓度

@勾凌6490:蛋白质loadingbuffer配方是什么?蛋白质loading
子卓19124476687…… 分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.21.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.30.7%,DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.81.0%

@勾凌6490:SDS - PAGE时样品中都加什么 -
子卓19124476687…… 将loading buffer与你的蛋白样品按比例混合,高温变性后,放冰上5分钟后,上样电泳. loading buffer中包含甘氨酸,Tris-Hcl,SDS,甘油,溴酚兰,β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT). 甘氨酸和Tris-Hcl用来提供正负离子;SDS是变性剂,同时屏蔽蛋白本来的电荷;β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,进一步打开蛋白间亚结构.

@勾凌6490:WESTERN BLOT煮蛋白用得是几乘的loading buffer ,样品100ul,5 乘的加多少? - 作业帮
子卓19124476687…… [答案] 一般用1乘的终浓度,那么: 1如果你最终样品溶液希望是100ul,那就是:样品+20(ul)5乘原液+80(ul)ddH2O 2如果你的样品已经有100ul,那就看你拿多大的管子来煮了.如果用2ml管子煮,最好配1ml终液,那就是:样品液(100ul)+200(ul)5乘原...

@勾凌6490:电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?请大神解答,3Q~ -
子卓19124476687…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.

@勾凌6490:WESTERN中蛋白样品怎么提取 -
子卓19124476687…… 组织去了之后 放入匀浆器中 加入RIPA裂解液 研磨 14000rpm离心5分钟 取上清液即可.

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