iptg诱导原理及应用
@徐伟5415：请教:IPTG的诱导原理是什么 -
能典19668892963…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@徐伟5415：IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
能典19668892963…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@徐伟5415：IPTG的作用具体是什么 - 作业帮
能典19668892963…… [答案] 异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用.
@徐伟5415：IPTG诱导表达的作用原理是什么? -
能典19668892963…… Binding of the repressor-IPTG complex to the operator can be studied by using greater concentrations of the protein in the methylation protection/enhancement assay. The large amount compensates for the low affinity of the repressor-IPTG complex...
@徐伟5415：为什么使用iptg诱导蛋白表达 -
能典19668892963…… E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷 酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状...
@徐伟5415：葡萄糖和乳糖细菌iptg怎么诱导 -
能典19668892963…… IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量(1mmol/L)即可达到理想诱导效果.由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达.不受细胞代谢的影响,诱导效果持续稳定.乳糖有双效作用,既能做为诱导剂异乳糖的前体物质,又可以做碳源,在诱导过程中,很不稳定,IPTG因其优异的稳定性决定了它适合做实验研究用.但是IPTG价格高,且有毒性,限制了其工业化大生产.
@徐伟5415：BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导
能典19668892963…… BL21细胞基因组中的T7 promoter可以被IPTG诱导,诱导后其promoter下游基因产物T7 RNA polymerase表达增多,T7 RNA polymerase又可以将转入BL21细胞中的质粒目的基因转录成mRNA,进而表达为蛋白质.因此,IPTG诱导可以使BL21细胞表达更多目的蛋白.
@徐伟5415：pgex - 6p - 1怎样用iptg诱导 -
能典19668892963…… 一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大孝性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻.
@徐伟5415：抗体制备小规模测试表达程序 有哪些? -
能典19668892963…… 操作规程1 原理:当有乳糖存在时,lac 操纵子(元)即可被诱导.在这个操纵子(元) 体系中,真正的诱导剂并非乳糖本身.乳糖进入细胞,经 b-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖.后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导...
能典19668892963…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@徐伟5415：IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
能典19668892963…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@徐伟5415：IPTG的作用具体是什么 - 作业帮
能典19668892963…… [答案] 异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用.
@徐伟5415：IPTG诱导表达的作用原理是什么? -
能典19668892963…… Binding of the repressor-IPTG complex to the operator can be studied by using greater concentrations of the protein in the methylation protection/enhancement assay. The large amount compensates for the low affinity of the repressor-IPTG complex...
@徐伟5415：为什么使用iptg诱导蛋白表达 -
能典19668892963…… E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷 酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状...
@徐伟5415：葡萄糖和乳糖细菌iptg怎么诱导 -
能典19668892963…… IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量(1mmol/L)即可达到理想诱导效果.由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达.不受细胞代谢的影响,诱导效果持续稳定.乳糖有双效作用,既能做为诱导剂异乳糖的前体物质,又可以做碳源,在诱导过程中,很不稳定,IPTG因其优异的稳定性决定了它适合做实验研究用.但是IPTG价格高,且有毒性,限制了其工业化大生产.
@徐伟5415：BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导
能典19668892963…… BL21细胞基因组中的T7 promoter可以被IPTG诱导,诱导后其promoter下游基因产物T7 RNA polymerase表达增多,T7 RNA polymerase又可以将转入BL21细胞中的质粒目的基因转录成mRNA,进而表达为蛋白质.因此,IPTG诱导可以使BL21细胞表达更多目的蛋白.
@徐伟5415：pgex - 6p - 1怎样用iptg诱导 -
能典19668892963…… 一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大孝性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻.
@徐伟5415：抗体制备小规模测试表达程序 有哪些? -
能典19668892963…… 操作规程1 原理:当有乳糖存在时,lac 操纵子(元)即可被诱导.在这个操纵子(元) 体系中,真正的诱导剂并非乳糖本身.乳糖进入细胞,经 b-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖.后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导...
