loading用什么稀释

@狄玛1811:蛋白电泳蛋白浓度过高用什么稀释 -
姚任18816624888…… 你的蛋白用什么溶解的就用什么稀释 如果已经加了Loading buffer,要保持Loading buffer的浓度,不要也一起稀释了

@狄玛1811:loading buffer 怎么调蛋白浓 -
姚任18816624888…… 要用loading buffer来调整蛋白浓度,可以通过配制出不同浓度的loading buffer来实现 最终加入到蛋白样品的loading buffer应该是1个单位的 可以通过配制出2~10个单位不等的loading buffer来调整蛋白浓度 比如2个单位的loading buffer加入蛋白样品,可以将蛋白浓度稀释一倍 而4个单位的loading buffer加入蛋白样品,就只能稀释25% 所以可以通过配制出不同浓度的loading buffer来调整蛋白浓度

@狄玛1811:电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?请大神解答,3Q~ -
姚任18816624888…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.

@狄玛1811:含溴酚蓝的loading buffer配方 跑DNA的 要10*的 我记得只用溴酚蓝 和甘油 然后加水溶解 但是比例忘记了 急 -
姚任18816624888…… 6*Loading buffer:30mM EDTA36%(v/v) Glycerol0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF0.05%(w/v) Bromophenol Blue 主要用于DNA电泳10*Loading buffer:30mM EDTA50%(v/v) Glycerol0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF0.25%(w/v) Bromophenol Blue 主要用于RNA电泳

@狄玛1811:求助蛋白电泳1*loading buffer -
姚任18816624888…… 蛋白电泳1*loading buffer可以配制出来,但是却很难在实际使用的时候用上 比如说蛋白电泳5*loading buffer,在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品.这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1*loading buffer 如果说1*loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品,这样的loading buffer配制出来也没办法用.所以说蛋白电泳1*loading buffer是指应用时的情况,而不是配制的浓度

@狄玛1811:DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是?6*的一定要稀释成1*的使用吗? - 作业帮
姚任18816624888…… [答案] 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.

@狄玛1811:western blot中蛋白样品浓度怎样稀释?用PBS稀释吗?如果说每孔加入50ug,上样量25ul,那么是不是把蛋白稀释成2.4ug/ul,然后在加入6*loadingbuffer变... - 作业帮
姚任18816624888…… [答案] 计算出样品及buffer的体积,加水补足到25ul

@狄玛1811:western blot蛋白样品用什么稀释至一样的浓度,还有就是蛋白maker如何稀释至一样的体积? - 作业帮
姚任18816624888…… [答案] 用1X loading buffer稀释即可.

@狄玛1811:DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是? -
姚任18816624888…… 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.

@狄玛1811:电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?3Q~ - 作业帮
姚任18816624888…… [答案] 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.

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